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細胞凍存與復蘇操作步驟與注意事項文檔
2025-08-28
細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種，起到了細胞保種的作用。一、原理在不加任何條件下直接凍存細胞時，細胞內(nèi)和外環(huán)境中的水都會形成冰晶，能導致細胞內(nèi)發(fā)生機械損傷、電解質(zhì)升高、滲透壓改變、脫水、PH改變、蛋白變性等，能引起細胞死亡。如向培養(yǎng)液加入保護劑，可使冰點降低。...
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關于CCK8實驗步驟的敘述
2025-08-28
CCK-8為細胞增殖檢測試劑盒，細胞增殖是生物體的重要生命特征，細胞以分裂的方式進行增殖。必須強調(diào)指出，通過細胞分裂，可以將復制的遺傳物質(zhì)，平均地分配到兩個子細胞中去?？梢?，細胞增殖是生物體生長、發(fā)育、繁殖和遺傳的基礎。CCK8實驗步驟如下。CCK-8實驗步驟1、在96孔板中配置100μl的細胞懸液。將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱預培養(yǎng)24小時（37℃，5%CO2）。2、向培養(yǎng)板加入10μl不同濃度的待測物質(zhì)。3、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱孵育一段適當?shù)臅r間（例如：6、12、24或48小時）。4、向...
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MTT法檢測細胞活性步驟及原理
2025-08-26
要知道MTT法檢測細胞活性步驟首先要知道MTT是什么？MTTMTT是一種粉末狀化學試劑，全稱為3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide，漢語化學名為3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴鹽，商品名：噻唑藍。是一種黃顏色的染料。MTT法檢測細胞活性原理檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲瓚（Formazan）并沉積在細胞中，而死細胞無...
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MTT實驗步驟有哪些，有什么注意事項
2025-08-26
MTT通常用于藥物(也包括其他處理方式如放射線照射)對體外培養(yǎng)的細胞毒性的測定以及.細胞增殖及細胞活性測定。該方法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定等。它的特點是靈敏度高、經(jīng)濟。但是由于MTT經(jīng)還原所產(chǎn)生的甲瓚產(chǎn)物不溶于水，需被溶解后才能檢測。這不僅使工作量增加，也會對實驗結果的準確性產(chǎn)生影響，而且溶解甲瓚的有機溶劑對實驗者也有損害。在MTT實驗步驟中要注意的是MTT有致癌性，用的時候小心,有條件最好帶那種透明的薄...
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簡述細胞培養(yǎng)的步驟
2025-08-26
細胞培養(yǎng)技術也叫細胞克隆技術，在生物學中的正規(guī)名詞為細胞培養(yǎng)技術。現(xiàn)代生物技術一般認為包括基因工程技術、細胞工程技術、酶工程技術和發(fā)酵工程技術，而這些技術的發(fā)展幾乎都與細胞培養(yǎng)有密切關系，特別是在醫(yī)藥領域的發(fā)展，細胞培養(yǎng)更具有特殊的作用和價值。以下來具體講一下細胞培養(yǎng)的步驟。細胞培養(yǎng)的步驟一、細胞復蘇：1.將新鮮培養(yǎng)基置于37℃水浴鍋中回溫，回溫后噴以75%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。如配置：50mL完-全培養(yǎng)基(含10%FBS，1%青鏈霉素雙抗)44.5mL基礎培養(yǎng)基+...
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動物外周血淋巴細胞分離液的注意事項
2025-08-26
使用的注意事項：1.開封前顛倒混勻，本分離液為無菌產(chǎn)品，為延長分離液保存時間，請在無菌條件下啟封，避免微生物污染。。2.分離液使用時應始終保持室溫（18℃~25℃），如室內(nèi)溫度較低，可將分離液預熱。4℃或者是溫度較低的條件下離心，可能會導致白膜層中紅細胞污染加重。3.血液樣本最好為新鮮抗凝血（采血2h以內(nèi)），為保持淋巴細胞的活性，應避免冷凍和冷藏。4.稀釋血液或洗滌細胞，不可使用含Ca、Mg離子的緩沖液及培養(yǎng)液，其成分會導致血細胞凝集，大大降低細胞得率及純度。5.部分塑料制品...
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Hoechst-細胞調(diào)亡
2025-08-26
細胞凋亡是指為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，由基因控制的細胞自主的有序的死亡。細胞凋亡與細胞壞死不同，細胞凋亡不是一件被動的過程，而是主動過程，它涉及一系列基因的激活、表達以及調(diào)控等的作用；它并不是病理條件下，自體損傷的一種現(xiàn)象，而是為更好地適應生存環(huán)境而主動爭取的一種死亡過程。細胞發(fā)生凋亡時，就像樹葉或花的自然凋落一樣，對于這種生物學觀察，借用希臘“Apoptosis”來表示，意思是像樹葉或花的自然凋落，可譯為細胞凋亡。其實從嚴格的詞學意義上來說，細胞程序性死亡與細胞凋亡是有很大區(qū)別的。...
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姬姆薩染色液：細胞與微生物的“精準顯影劑”
2025-08-26
姬姆薩染色液是一種由天青Ⅱ與伊紅混合制成的復合染色劑，其核心作用是通過特異性結合細胞內(nèi)不同化學成分，實現(xiàn)以下功能：細胞形態(tài)與結構可視化血細胞分類：清晰區(qū)分紅細胞（粉紅色）、白細胞（紫藍色/淡紫色）及血小板（淡紫色），常用于外周血細胞分類和骨髓涂片分析。細胞器與顆粒顯色：對嗜酸性顆粒（粉紅色）、嗜堿性顆粒（紫藍色）及中性顆粒（淡紫色）著色鮮明，輔助識別細胞類型及功能狀態(tài)。染色體顯帶：在染色體G顯帶技術中，通過與DNA結合呈現(xiàn)深淺交替的橫紋樣帶紋，用于染色體核型分析及遺傳病診斷。...
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