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談?wù)凩B培養(yǎng)基常用的滅菌方法
2020-11-20 今天我給大家講講微生物檢查LB培養(yǎng)基常用的滅菌方法：1、濕熱滅菌：蒸汽在冷凝時釋放出大量潛能，并且蒸汽具有強大穿透力，蒸汽的濕熱破壞菌體蛋白質(zhì)和核酸的化學鍵，使酶失活，微生物因代謝障礙而死亡。濕熱滅菌的效果，取決于致死溫度和致死時間。致死溫度是殺滅微生物的極限溫度。致死時間是在致死溫度下殺滅全部微生物所需時間。高壓蒸汽滅菌適合于耐高溫LB培養(yǎng)基、接種器械和蒸餾水的滅菌。培養(yǎng)基分裝后應立即滅菌，應在當天內(nèi)完成滅菌工作，不可過夜。消毒時間不宜過長，也不能超過規(guī)定的壓力范圍，否則有...
你知道什么是ELISA試劑盒溫育嗎？
2020-11-17 ELISA試劑盒中一般有3次加樣步聚，即加標本，加酶結(jié)合物，加底物。加樣時應將所加物加在ELISA試劑盒板孔的底部，避免加在孔壁上部，并留意不行濺起，不行發(fā)作氣泡。加標本一般用微量加樣器，按規(guī)則的量參加板孔中。每次加標本應更換吸嘴，避免發(fā)作交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定(如間接法ELISA)需用稀釋的血清，可在試管中按規(guī)則的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中參加稀釋液，再在其中參加血清標本，然后在微型震動器上震動1分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物使用液和底物使用液時...
Elisa試劑盒技術(shù)可以充分利用單克隆抗體的優(yōu)點
2020-11-09 ELISA試劑盒是以免疫學反應為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。免疫酶技術(shù)是將酶標記在抗體/抗原分子上，形成酶標抗體/酶標抗原，稱為酶結(jié)合物。該酶結(jié)合物的酶在免疫反應后，作用于底物使之呈色，根據(jù)顏色的有無和深淺，定位或定量抗原/抗體。ELISA試劑盒是免疫酶技術(shù)的一種，其特點是利用聚苯乙烯微量反應板(或球)吸附抗原/抗體，使之固相化，免疫反應和酶促反應都在其中進行。在每次反應后都要反復洗滌，這既保證了反應的定量關(guān)系，也避...
ELISA試劑盒實驗中血清標本宜在新鮮時檢查
2020-11-06 ELISA試劑盒實驗中可用作ELISA測定的標本十分廣泛，體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、大便)等均可作標本以測定其間某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清、尿液)，有些則需經(jīng)預處理(如大便和某些分泌物)。血漿中除尚富含纖維蛋白原和抗凝劑外，別的成份均對等于血清。制備血漿標本需借助于抗凝劑，而血清標本只需待血清天然凝集、縮短后即可取得。除特殊情況外，在醫(yī)學查驗中均以血清作為檢查標本。在ELISA中血漿和血清可對等運用。血清標本可按慣例方法收集，應留...
談?wù)劶毎蛲龅男獧C制
2020-10-28 今天來了解一下細胞凋亡的效應機制吧凋亡細胞的特征性表現(xiàn)，包括DNA裂解為200bp左右的片段，染色質(zhì)濃縮，細胞膜活化，細胞皺縮，后形成由細胞膜包裹的凋亡小體，然后，這些凋亡小體被其他細胞所吞噬，這一過程大約經(jīng)歷30-60分鐘，Caspase引起上述細胞凋亡相關(guān)變化的全過程尚不*清楚，但至少包括以下三種機制：1凋亡抑制物正?；罴毎驗楹怂崦柑幱跓o活性狀態(tài)，而不出現(xiàn)DNA斷裂，這是由于核酸酶和抑制物結(jié)合在一起，如果抑制物被破壞，核酸酶即可激活，引起DNA片段化。現(xiàn)知caspase...
ELISA試劑盒的基本原理有這三條，你知道嗎？
2020-10-26 ELISA試劑盒因此含雜質(zhì)較多的抗原也可選用捕獲包被法,試驗的特異性、敏感性均由此得以改善，重復性亦佳。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附聯(lián)絡(luò)的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的效果于?？蓪⒕郾揭蚁┌逑冉?jīng)紫外線照射(例如30W紫外燈，75cm照射12小時)，以增加其吸附功能。例如，在檢查抗DNA抗體時，需用DNA作為包被抗原，ELISA試劑盒而廣泛的固相載體一般不能直接與核酸聯(lián)絡(luò)。換言之，包被就是抗原或抗體聯(lián)絡(luò)到固相載體表面的進程。當抗原決定簇...
ELISA試劑盒洗滌的兩大方法
2020-10-14 洗滌雖不是一個反應步驟，但卻也決定著實驗的成敗。ELISA靠洗滌來達到分離游離的和結(jié)合的酶標記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)，以及在反應過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。重點分析：ELISA試劑盒洗滌的兩大方法一、浸泡式1.吸干或甩干孔內(nèi)反應液;2.用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后，即甩去);3.浸泡，即將洗滌液注滿板孔，放置1-2分鐘，間歇搖動，浸泡時間不可隨意縮短;4.吸干孔內(nèi)液體。吸干應*，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液...
ELISA試劑盒在試驗過程中需要注意什么
2020-10-12 ELISA試劑盒是一種敏感性高，特異性強，重復性好的試驗確診方法。盡管ELISA試劑盒的操作過程看似簡單，但沒做到位的話就會影響試驗的作用。所以在試驗過程中這幾點非常重要：1、重要的洗刷：不充分的洗刷會導致差異和高布景，從而帶來不抱負的試驗結(jié)果。假如未結(jié)合的材料殘留在微孔板中，那么它會添加布景噪音。有必要的話，可添加洗刷液中的鹽濃度，這會阻止非特異結(jié)合反響。假如布景過高，置疑洗刷不行時，能夠測驗添加洗刷次數(shù)。2、關(guān)鍵的關(guān)閉：關(guān)閉液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據(jù)微孔板中潛在的結(jié)合位...

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